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糖類不僅在生命活動過程中起著重要的作用，還廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)，制藥，發(fā)酵和食品等行業(yè)。

一、單糖的結(jié)構(gòu)
        單糖是一類手性多羥基醛或多羥基酮化合物。葡萄糖是最常見的糖類化合物，其結(jié)構(gòu)式如下：

二、寡糖和多糖

         單糖通過苷鍵連接生成糖鏈，根據(jù)單糖的數(shù)目，稱為寡糖或多糖，寡糖和多糖沒有明確的界限，一般認(rèn)為寡糖由2-10個單糖組成，多糖由10個以上單糖組成。

三、糖類分析方法

         糖類物質(zhì)的分析手段有很多，如，液相色譜（HPLC），離子色譜（IC），氣相色譜法（GC）和 高效毛細(xì)管電泳法（HPCE）等，高效液相色譜法是目前糖類物質(zhì)分析最常用的手段。

         糖類化合物具有多羥基結(jié)構(gòu)，分子極性大，使用常規(guī)的反相保留模式（如C18）很難保留，因此在液相色譜中一般采用其它保留模式進(jìn)行糖的分離。

        1. 氨基柱

            氨基柱的官能團(tuán)是氨丙基，由于對糖有較高的分離效率，因此很多標(biāo)準(zhǔn)方法（如 GB 5009.8-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、乳糖的測定）均推薦使用氨基柱和示差折光檢測器進(jìn)行五種糖的分離。

          下圖為ACE 氨基色譜柱分離五種糖的譜圖

            色譜柱：ACE EXL 5 NH2  5μm，4.6 ? 250mm（PN：ACETEXL-1214-2546U）

            流動相：乙腈：水=80  ：20 v/v

            流速：3mL/min

            進(jìn)樣量：20μL

            柱溫：40℃

            檢測器：示差折光檢測器，35℃

            樣品：果糖，葡萄糖，蔗糖，麥芽糖，乳糖，濃度均為 5mg/mL

1-果糖     2-葡萄糖    3-蔗糖     4-麥芽糖     5-乳糖

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        2. Waters 酰胺基色譜柱（BEH Amide）

            基于沃特世新穎的BEH雜化硅膠顆粒技術(shù)，BEH Amide色譜柱使用化學(xué)穩(wěn)定耐受的、三鍵鍵合的酰胺基(Amide)鍵合相，從根本上解決了氨基鍵合硅膠柱不能耐受高pH和鍵合相流失嚴(yán)重的問題，柱壽命大大延長，同時避免了氨基柱和糖形成Schiff堿的問題。

             色譜柱：Xbridge BEH Amide  3.5μm，4.6 ? 250mm（PN：186004870）

             流動相：75：25乙腈：水+0.2%三乙胺

             流速：1.0 mL/min

             進(jìn)樣量：15μL

             柱溫：35℃

             檢測器：示差折光檢測器

             樣品：果糖，葡萄糖，蔗糖，麥芽糖，乳糖

 1-果糖     2-葡萄糖    3-蔗糖     4-麥芽糖     5-乳糖

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       3. 配體交換/體積排阻色譜柱

           色譜柱采用表面磺化的聚苯乙烯-二乙烯苯樹脂填裝而成，樹脂表面可結(jié)合多種離子 (H+，Ca2+，Pb2+，Na+，K+)。 分離機制包括離子排阻、配體交換、尺寸排阻、反相等多種相互作用模式，采用簡單的等度方法即可為糖和有機酸    提供不同于氨基柱的獨特的分離能力。 

          據(jù)粗略統(tǒng)計，各國藥典和食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)有幾十種方法推薦使用液相色譜方法進(jìn)行糖的分析，如《GB/T 20880-2018 食用葡萄糖》，2020版中國藥典《海藻糖 》含量和有關(guān)物質(zhì)的測定等。

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